O agar de dextrose de batata (PDA) é um bom meio semi-sólido de uso geral usado para cultivar fungos. É freqüentemente usado para isolar, cultivar e manter espécies que formam cogumelos. Pratos de Petri prontos para uso ou tubos de ensaio contendo PDA podem ser comprados ou PDA pode ser fabricado rapidamente usando uma pré-mistura comercial. No entanto, não é difícil criar uma versão simples e eficaz do zero, com pouco custo.
crédito: Zedcor Propriedade própria / PhotoObjects.net / Getty ImagesPreparando extrato de batata
Passo 1
Coloque as batatas em uma panela com aproximadamente 1,2 litros de água da torneira e deixe ferver no fogão por 1 hora.
Passo 2
Retire a panela do fogo e deixe o líquido esfriar até que possa ser manuseado confortavelmente (cerca de 10 minutos).
Etapa 3
Despeje o extrato de batata líquida através de um coador ou gaze e colete-o em outro recipiente.
Preparando o Meio
Passo 1
Adicione dextrose e ágar a 1 litro de água de extrato de batata.
Passo 2
Teste o pH da solução com papel de teste de pH ou um medidor de pH.
Etapa 3
Se o pH estiver acima de 6,5, ajuste-o adicionando uma gota da solução de ácido clorídrico de cada vez e testando novamente.
Passo 4
Se o pH estiver abaixo de 6, ajuste-o adicionando uma gota da solução de hidróxido de sódio por vez e testando novamente.
Esterilização
Passo 1
Misture bem o meio e divida-o em lotes menores de 250 mL derramados nos quatro frascos de 500 mL (Nota: cada frasco não deve ter mais que a metade do volume para evitar transbordar).
Passo 2
Cubra cada frasco com um pedaço de papel alumínio frisado, para que o papel não caia, mas não faça uma vedação firme.
Etapa 3
Coloque os frascos em uma panela de pressão.
Passo 4
Opere a panela de pressão de acordo com as instruções do fabricante para esterilizar o PDA a 121 graus C (250 graus F) a uma pressão de 103.421 Pascal (15 PSI) por 15 minutos.
Etapa 5
Desligue a panela de pressão e deixe-a voltar à pressão atmosférica; em seguida, remova os frascos e deixe esfriar até que possam ser manuseados.
Derramando o Meio
Passo 1
Alinhe as placas de Petri estéreis em uma superfície plana.
Passo 2
Quando os frascos tiverem esfriado até a temperatura de manuseio, mas antes que o meio comece a solidificar, segure-o com uma mão e remova e reserve a tampa de alumínio com a outra mão.
Etapa 3
Para cada placa de Petri, levante a tampa com uma mão, encha rapidamente até a metade com PDA líquido e recoloque a tampa.
Passo 4
Repita a Etapa 3 acima até que todas as placas de Petri estejam cheias.
Etapa 5
Se sobrar algum PDA, recupere o frasco com a tampa de alumínio original, deixe esfriar e solidifique, aperte a tampa e guarde na geladeira.
